蜜蜂为农作物种植提供重要的授粉服务,为全球农业经济贡献了数十亿美元。然而,近年来蜜蜂数量大幅减少,主要原因包括栖息地丧失、农药暴露等问题。新烟碱类杀虫剂,尤其是硝基取代类,对蜜蜂具有较高毒性,影响其觅食、飞行和记忆,并可能导致寿命缩短。尽管农药管理措施有所加强,蜜蜂的解毒挑战仍未解决。在这里,康奈尔大学马明林教授团队提出了一种简单且可扩展的解决方案,通过可摄入水凝胶微粒(IHM)在体外及蜜蜂消化道中捕捉新烟碱类物质,从而减轻农药的有害影响。研究使用常见的东方大黄蜂(Bombus impatiens)作为模式物种,并以新烟碱类农药吡虫啉为代表,证明了 IHM 治疗的显著效果。在致死剂量的吡虫啉暴露下,接受 IHM 治疗的蜜蜂存活率比未治疗组高出 30%。在亚致死剂量(5 ng)下,IHM 处理明显改善了蜜蜂的采食行为,并使参与运动活动的蜜蜂数量增加了 44%。尽管单次服用 5 或 10 ng 吡虫啉后蜜蜂的振翅频率显著下降,IHM 治疗仍能有效改善这一情况。总体而言,IHM 提升了大黄蜂的健康状况,未来通过进一步优化,该技术有望为养蜂业带来益处,降低蜜蜂在作物授粉期间的风险。相关成果以“Ingestible hydrogel microparticles improve bee health after pesticide exposure”为题发表在《Nature Sustainability》上。
IHM 的体外吸附能力
评估这些 IHM 功效的第一步(图1b)是确定它们在生理相关的pH值下能否吸附新烟碱类杀虫剂(图1c、d)。吡虫啉的拟合结果显示,伪一阶模型的 R² 值较高,表明其吸附过程主要受物理吸附限制。此外,研究还分析了不同浓度的 IHM 对吡虫啉的捕获效果。结果显示,吡虫啉的捕获率与 IHM 浓度成正比,使用 5mg/ml 的 IHM 浓度可实现高达 78% 的去除率。
图 1:使用 IHM 和 IHM 表征的农药解毒策略示意图
高吡虫啉暴露后蜜蜂的存活率
首先,作者评估未接触吡虫啉的蜜蜂存活率,以确定IHM是否影响死亡率。结果显示,提供普通蔗糖糖浆和IHM糖浆的蜜蜂存活率无显著差异(图2a)。进一步测试表明,IHM不影响蜜蜂的花粉消耗(图2b)。当蜜蜂暴露于4ppm吡虫啉时,存活率明显下降,但加入IHM后,存活率提高了约30%,从58%上升至87%(图2d)。统计分析表明,IHM处理显著提高了蜜蜂的存活率,而延长至34天的评估未发现存活差异。
图 2:存活率测定和花粉消耗
为了确认 IHM 的可摄入性和通过消化道的运动,制作者通过荧光显微镜观察了其体内分布(图3a-e)。在0小时和1小时内,IHM 已经出现在蜜蜂的嗉囊和脑室中。8小时后,IHM进一步进入脑室并到达后肠(图3c)。到48小时时,IHM 主要集中在后肠,脑室中只剩下一些荧光信号,部分笼子里的排泄物呈蓝色,显示IHM已被排出。使用Cy5标记的IHM表现出肉眼可见的蓝色。同时,在整个8天的实验中,蜜蜂的消化道内始终存在IHM,证实蜜蜂持续摄取IHM糖浆(图3d)。此外,IHM的形态在消化过程中保持不变(图3e)。
图 3:体内 IHM 追踪
亚致死吡虫啉暴露后蜜蜂的健康状况
在观察到 IHM 提高蜜蜂存活率后,研究了吡虫啉的亚致死作用。初步测试发现,高剂量吡虫啉(500 ng)导致蜜蜂快速死亡,而50 ng剂量使蜜蜂昏睡且失去活力,因此亚致死作用评估使用5 ng和10 ng剂量(图4a)。测试显示,无论是否使用 IHM,蜜蜂在接受吡虫啉后糖浆(蜜蜂的食物)消耗量显著下降(图4b),但5 ng 剂量的 IHM 处理组糖浆消耗有所增加。进一步评估发现,IHM 处理显著改善了蜜蜂的运动能力,在5 ng吡虫啉处理下,蜜蜂的活动增加了44%(图4c、4d),但所有吡虫啉处理组的运动能力仍低于对照组。总体来说,IHM 改善了蜜蜂的进食和运动表现,但未完全恢复到正常水平。
图 4:糖浆消耗量和运动活动
最终的亚致死评估关注了大黄蜂的翅膀拍动频率(WBF)。如图5a所示,吡虫啉处理后,未接受 IHM 治疗的蜜蜂在5 ng 和10 ng剂量下,WBF 分别下降了11% 和15%(图5b)。研究发现,吡虫啉剂量和 IHM 的存在对 WBF 有显著影响,但二者的相互作用没有统计学显著性。5 ng 剂量的 IHM 处理组表现出显著的 WBF 改善,但0 ng 和10 ng 剂量下没有显著差异。翅膀长度和环境条件对 WBF 也有影响,但本研究中不同组间的翅膀长度差异不显著(图5c)。
图 5:翅膀拍动频率
小结与讨论
蜜蜂对全球农业和授粉至关重要,但其健康正因栖息地丧失、农药和气候变化等因素受到威胁,数量显著下降。为应对这一问题,本研究开发了花粉启发的酶微粒(IHM),以减轻新烟碱类杀虫剂(如吡虫啉)对蜜蜂的毒性。通过沉淀聚合方法合成的 IHM 直径约 5 μm,能够通过物理吸附捕获吡虫啉,降低其在蜜蜂体内的游离浓度。实验结果显示,IHM 处理提高了蜜蜂的存活率和运动能力,尤其在暴露于5 ng 吡虫啉剂量后,翅膀拍动频率(WBF)显著改善(图5b)。虽然 IHM 改善了蜜蜂健康,但在较长时间范围内和多种农药组合下仍需进一步测试。这项研究为未来基于 IHM 的蜜蜂农药解毒技术提供了可行的方向,有望增强蜜蜂抵御田间有害农药的能力。
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